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    Arcticzymes-PCR研究方案

    發(fā)布時間: 2023-03-07  點擊次數(shù): 508次

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    多年來,人們一直利用 PCR 產(chǎn)物清除 SAP 和外切核酸酶 I 來提供一種簡單有效的方法,在測序或基因分型之前從 PCR 產(chǎn)物中去除核苷酸和引物。原則上,SAP 使核苷酸去磷酸化,exoI 降解引物,否則引物會干擾引物延伸反應(yīng)。

    2單位 SAP10單位核酸外切酶在37 °C 孵育15分鐘在80 °C 滅活15分鐘 PCR 產(chǎn)物現(xiàn)在可以進行測序或基因分型了。產(chǎn)品可貯存在攝氏零下20度,直至需要為止。

    蝦堿性磷酸酶/蝦堿性磷酸酶仍然是市面上的黃金標準和第一款不耐熱的堿性磷酸酶。這是一種多用途堿性磷酸酶,可以通過短期熱處理全滅活。在65攝氏度下100% 的熱滅活在限制酶緩沖區(qū)中工作用于聚合酶鏈式反應(yīng)清理去除 DNA,RNA 中的5’-磷酸鹽,熱失活02468100% 20% 40% 60% 80% 100% 65 ° C 75 ° C 分鐘活動時間65 ° C 75 ° C 0100% 100% 0.585% 0% 128% 0% 27% 0.50% 0% 100% 0% 圖表由 VisualizerSAP 制作室溫穩(wěn)定性0728810% 20% 40% 60% 80% 100% 天和室溫剩余活性室溫剩余活性0100794281008196圖表由 VisualizerSAP 制作自1993年上市以來,現(xiàn)已被新的更好的重組形式所取代。重組酶是在 Pichia Pastoris 生產(chǎn)的,具有經(jīng)過充分驗證的本地版本的所有特性,但具有額外的好處。該重組版本在環(huán)境溫度下更穩(wěn)定,也具有高純度、一致性,并且可在高濃度的較大批次中使用

    性能規(guī)范單元定義一個單元將在0.1 M 甘氨緩沖液中,每分鐘1μmol 的對硝基苯基磷酸鹽在37 °C  pH10.4,1mM  ZnCl 2 MgCl 2以及6mM 4-硝基苯基磷酸鹽中轉(zhuǎn)化為硝基酚和磷酸鹽。這個單位的定義使1個單位的 SAP 相當于540個單位的南極磷酸酶(新英格蘭生物實驗室1.3個單位的 APEX 磷酸酶或35個單位的 NTPhos 磷酸酶(震中生物技術(shù)公司)。因此,SAP 是具持續(xù)性的替代方案。比活度: > 2000單位/毫克。純度未檢測到 DNA 酶活性。濃度10000單位/毫升,最高可達30000單位/毫升。批量: 2,500 -3,500萬件/批。在儲存緩沖液(25mM Tris-HCl pH 7.6,5mM MgCl 2,甘油50%)中在 -20 °C 下穩(wěn)定。在室溫下,90天后仍有 > 95% 的活性。然而,這種酶在65 °C 5分鐘后就全失活了。在攝氏75度,SAP 1分鐘后全失效。在一個標準的熱循環(huán)系統(tǒng)中,從37度到95度再回到37度的加熱過程足以使 SAP 全失去活性。知識產(chǎn)權(quán)重組 SAP 包括以下專: US 7,323,325,EP 1,326,890JP 4,191,479,AU 9,398,701以及其他國家已經(jīng)批準或正在申請的相關(guān)利。

    克隆載體去磷酸化產(chǎn)生體內(nèi)克隆載體用于同源重組平行克隆大型基因簇。Yeom 律政司司長李、李、蔡仕及李?;蚍中突驕y序前核苷酸的降解微衛(wèi)星不穩(wěn)定大腸癌編碼區(qū)點突變的綜合評估??椎铝?/span> J,薩洛卡斯 K,薩里寧 L,奧瓦斯卡 K,勞安海默 H,普拉凱蒂 RM,漢堡 J,劉 X,亞達夫 L,吉爾夫 AE,卡朱索 T,漢寧 UA,佩林 K,里斯托萊寧 H,卡泰寧 R,卡西寧 E,坦斯卡寧 T,阿維科 M,泰帕雷 M,泰帕雷 J,雷科寧-西尼薩洛 L,lepist? AKoskensalo S,B?hm J,Mecklin J-P,Ongen H,Dermitzakis ET,Kilpivaara O,Vahtento P,Turunen M,Hautaniemi S,Tuupanen S,Karhu A,V?lim?ki N,Varjosalo MPitk?nen E,Aaltonen LA.EMBO Mol Med.2018; 10(9) : e8552. 舞毒蛾亞科分子系統(tǒng)學研究(鱗翅目舞毒蛾科)。Dhungel B Wahlberg N.PeerJ.201866日,e4311角色塑造檢測到一種橫紋肌病毒,可導致黑頭鯰死亡。貝當多 G,潘扎林 V,福爾汀 A,贊佩林 G,普雷托 T,布拉汀 A,石英 RSabbion M,Salogni C,Pascoli F,Toffan A.J Fish Dis。2018; 41(7) : 1063-1075.

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    蛋白質(zhì)去磷酸化自磷酸化通過為 α 激酶結(jié)構(gòu)域中的變構(gòu)結(jié)合位點提供配體來激活盤基網(wǎng)柄菌肌球蛋白 II 重鏈激酶 A2607-16.一種日間調(diào)節(jié)的脫水海欖雌,在體外顯示核質(zhì)定位,并被酪蛋白激酶 II 磷酸化。Mehta PARebala KC,Venkataraman G,Parida A. 植物生理生化。2009; 47(8) : 701-9.SAP 為輔酶及其硫酯的定量提供了一種快速、靈敏的放射化學檢測方法。Wadler C,Cronan JE. Anal Biochem.2007; 368(1) : 17-23.酶消化法測定寡核苷酸的液相色譜-同位素稀釋質(zhì)譜法的比較。唐納德 CE,斯托克斯 P,奧康納 G,伍爾福德 AJ.J 色譜分析技術(shù)生物生命科學。2005; 817(2) : 173-82.Nordstr?m T。 ,Nourizad K ,Ronaghi M。 ,Nyrén P。2000; 282(2) : 186-93.描述性論文/基于 TdT 介導的氯化血紅素/G-四重脫氧核酶納米線的堿性磷酸酶活性靈敏電化學測定用于信號放大。(ScienceDirect 付費服務(wù))。劉艷,熊娥,李霞,李潔,張霞,陳潔生物傳感器與生物電子。2017; 87:970-975.蝦堿性磷酸酶的配體結(jié)合和金屬交換結(jié)晶學研究。2004; 60(9) : 1555-61。北方對蝦(Pandalus borealis)的熱可溶性堿性磷酸酶蛋白質(zhì)和 cDNA 序列分析。

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