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Cellutron 說明書
產品時間:2022-08-29
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北京華新康信也有Cellutron實驗試劑銷售,下面給大家講講Cellutron服務以及實驗樣本;

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穩(wěn)定的細胞系開發(fā)

Cellutron 提供定制的高質量穩(wěn)定細胞系服務,以優(yōu)化生產您感興趣的蛋白質?;虻郊毎瞻ɑ蚝铣?、靶向載體構建、細胞培養(yǎng)、轉染、穩(wěn)定細胞系的藥物選擇和轉基因表達的確認。憑借*的載體技術,Cellutron 能夠在多種細胞類型中產生穩(wěn)定的細胞系,包括小鼠和人類干細胞以及 iPS 細胞。

穩(wěn)定細胞系-G      穩(wěn)定細胞系-R

在熒光報告基因的初始轉導兩個月后,穩(wěn)定轉染的小鼠胚胎干細胞表達 GFP RFP。

親代細胞系:人和小鼠胚胎干細胞和 iPS、HEK293CHO、BHK、NS0 細胞、H9C2 或細胞系。

穩(wěn)定細胞系產生的過程和時間線:

1. 哺乳動物細胞表達載體的基因合成與構建            

進行優(yōu)化的基因合成并將基因克隆到哺乳動物細胞表達載體中(1 周)

2. 轉基因表達分析      

用表達載體轉染親本細胞系并通過 RT-PCR/Western blot/ELISA 評估轉基因的表達(1 周)

3. 篩選穩(wěn)定轉染子

對頂級克隆進行穩(wěn)定性篩選并評估最終細胞系的 10 次傳代。(約 4 周)

向客戶提供 2 瓶頂級穩(wěn)定克隆

請聯(lián)系客服索取申請表。

肌節(jié) α 肌動蛋白的免疫細胞化學染色

心肌細胞在 60 mm 板中培養(yǎng)

1X PBS 沖洗細胞,在室溫下用 PBS 中的 3.7% 甲醛固定細胞 10 分鐘,然后在 70% ETOH 5 分鐘,用 PBS 中的 0.2% Triton-X 100 孵育 5 分鐘,然后用 1X PBS 洗滌細胞兩次5分鐘。

1ml 2% BSA PBS 孵育細胞 30 分鐘。在板中加入針對肌節(jié) α 肌動蛋白 (Sigma, Cat#: A2172) 的原代小鼠抗體 1 小時,室溫,O/N,4°C。

1X PBS 清洗細胞 3 次,每次 10 分鐘。

HRP 偶聯(lián)的二抗在室溫下針對小鼠孵育 1 小時

1X PBS 清洗細胞 3 次,每次 10 分鐘。

1 ml DAB 溶液孵育 10 分鐘。用 1X PBS 清洗。

*在您需要之前準備新鮮的 DABSigma,Cat#D8001)溶液:

* 37 C 下解凍 DAB 原液,直到不再渾濁。將 5ul DAB 原液添加到 1ml 1X PBS 中。加入 1ul 30% H2O2 并充分混合。

在顯微鏡下檢查染色的細胞。

成人心肌細胞分離

成年大鼠/

貓:ac-7031

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其他的這些是菌株

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